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FAM-dT亞磷醯胺

這種亞磷醯胺允許在亞磷醯胺方法合成過程中將螢光素 (FAM) 引入寡核苷酸序列中的任何位置（在鏈的中間，在 5'- 和 3'- 末端）。該試劑是去氧胸苷亞磷醯胺和 FAM 6-異構體的結合物。在寡核苷酸合成過程中通過用螢光素-dT 亞磷醯胺取代標準 dT 亞磷醯胺進行修飾。這種修飾不影響核酸外切酶或聚合酶活性。 如需在 5' 末端用螢光素進行修飾，請使用 FAM 亞磷醯胺，6-異構體。 用法 耦合：10分鐘 脫保護：標準條件下使用氫氧化銨；脫保護時間取決於寡核苷酸組成和核堿基保護基團（在 55 °С 下脫保護 17 小時可去除標準核堿基上的所有保護基團）。用AMA（30% 氫氧化銨/40% 甲胺水溶液 1:1 v/v 的溶液）可形成約 5% 的非螢光副產物。為了避免副產物的形成，開始用氫氧化銨脫保護（室溫下30 分鐘），然後添加等體積的 40% 甲胺水溶液，繼續用AMA 按要求脫保護（例如 65 °C 下 10 分鐘）。