Реакционная смесь PCR/qPCR
Смесь PCR/qPCR подходит как для проведения количественной ПЦР, так и для амплификации ДНК с последующей детекцией результатов методом электрофореза. Готовая 2-кратная (B5534, G5534) или 5-кратная (B7534, G7534) реакционная смесь содержит необходимые компоненты для проведения ПЦР, ее состав оптимизирован для получения идеальных результатов по процессивности и специфичности амплификации (содержит Hot-start полимеразу). В случае постановки реакции кПЦР, для детекции флуоресценции следует использовать ДНК-зонд, меченный флуорофором и тушителем (гидролизуемые зонды, "молекулярные маяки", праймеры типа "скорпион") или два зонда, меченных флуорофорами, образующими FRET-пару (вы можете заказать синтез зондов в Lumiprobe). Помимо ДНК-зондов, для детекции флуоресценции может использоваться интеркалирующий краситель dsGreen (dsGreen). Из-за отсутствия в составе UDG/dUTP смесь PCR/qPCR может использоваться для рутинных задач по клонированию и других задач, требующих дальнейшего использования продукта ПЦР после амплификации. Для постановки реакции смешайте в пробирке смесь PCR/qPCR, праймеры, ДНК, воду и зонд/краситель (в случае кПЦР). Объём 2-кратной смеси 1 мл рассчитан на проведение 100 реакций объёмом 20 мкл. Объём 5-кратной смеси 1 мл рассчитан на проведение 200 реакций объёмом 25 мкл.
Формат ПЦР: стандартная ПЦР (с последующим анализом методом гель-электрофореза), количественная ПЦР (ПЦР-РВ) с применением интеркалирующих красителей типа dsGreen или гидролизуемых зондов
Состав реакционной смеси: HS Taq ДНК-полимераза, смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов, ПЦР-буфер (содержит Mg2+)
Совместимость с оборудованием: совместим с амплификаторами любого типа
Возможные приложения: кПЦР, стандартная ПЦР, ОТ-ПЦР, генотипирование, ПЦР для проверки колоний, получение продукта для ТА-клонирования и др.
Ключевые характеристики смеси:
- Для постановки стандартной ПЦР (с последующим анализом методом гель-электрофореза) в смесь необходимо добавить только образец ДНК, праймеры и воду, что значительно экономит время на постановку реакции.
- Для постановки количественной ПЦР в смесь необходимо добавить интеркалирующий краситель или зонд для детекции продукта амплификации, образец ДНК, праймеры и воду.
- Подходит для ПЦР фрагментов длиной до 3 тыс. п.о., не более 70% GC, не требующих высокоточной амплификации.
- В качестве матрицы может использоваться геномная, вирусная, плазмидная ДНК и др.
- Формат готовой реакционной смеси снижает риск контаминации образцов.
- В состав реакционной смеси входит Taq-полимераза с технологией "горячего старта" (Hot Start). Используемая HS Taq ДНК-полимераза представляет собой комплекс моноклональных антител с ферментом. Прогрев образца в первом цикле ПЦР приводит к инактивации антител в составе комплекса и активирует фермент. Технология "горячего старта" позволяет предотвратить неспецифическую амплификацию и образование димеров праймеров.
- HS Taq ДНК-полимераза обладает 5'-3' полимеразной, 5'-3' экзонуклеазной активностью; также обладает трансферазной активностью: присоединяет дополнительный адениновый остаток к 3′ концам двуцепочечной ДНК, что позволяет использовать продукты ПЦР для ТА-клонирования.
Таблица подбора мастер микса для ПЦР
Реакционные смеси для количественной ПЦР (ПЦР-РВ) | ||||
---|---|---|---|---|
Название смеси | dsGreen | ROX | UDG, dUTP | Применение |
ProbeMaster ROX+UDG qPCR mix Cat.# •5214 | — | ✔ | ✔ | кПЦР с ДНК-зондами или интеркалирующим красителем |
ProbeMaster ROX qPCR mix Cat.# •5114 | — | ✔ | — | |
ProbeMaster dsGreen+ROX qPCR mix Cat.# •5514 | ✔ | ✔ | — | кПЦР с интеркалирующим красителем |
All-in-one qPCR master mix Cat.# •5414 | ✔ | ✔ | ✔ | |
All-in-one no ROX qPCR master mix Cat.# •5314 | ✔ | — | ✔ | |
Реакционная смесь для стандартной ПЦР | ||||
Basic PCR master mix Cat.# •5024 | — | — | — | ПЦР с последующим анализом методом гель-электрофореза, содержит краситель для нанесения на гель |
Универсальная реакционная смесь | ||||
PCR/qPCR master mix Cat.# •5534 | — | — | — | кПЦР с ДНК-зондами/интеркалирующим красителем или стандартная ПЦР с последующим анализом методом гель-электрофореза |
顧客還購買了這個產品
R6G azide, 5-isomer
Rhodamine 6G is a xanthene dye that has been used for DNA sequencing and qPCR. This azide derivative is used for the attachment of the dye to DNA and other molecules by means of click chemistry.Pyrene azide 2
Pyrene azide with longer triethyleneglycol (PEG3) linker for click chemistry.立即在线获取免费快递服务证书