Fluo-4 AM,綠色螢光鈣離子指示劑 (Fluo-4 AM, green fluorescent calcium indicator)

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Fluo-4 AM 為細胞可滲透型的 Ca²⁺ 指示劑,經細胞內酯酶代謝後,於 Ca²⁺ 結合時產生強烈綠色螢光(激發/發射波長 λ = 494/506 nm)。它可用於觀察與測量細胞內鈣離子濃度,非常適合應用於顯微鏡觀察、流式細胞儀、螢光分光光度法以及高通量螢光微孔板篩選分析等技術中。

Fluo-4 AM 與廣泛使用的 Ca²⁺ 指示劑 Fluo-3 在結構與光譜特性上相似,但具有若干優勢,包括更高的螢光亮度、更快的細胞滲透速率,以及在緩衝液中對 Ca²⁺ 的解離常數(Kd)為 345 nM。由於螢光發射更強,Fluo-4 AM 可在較低的細胞內濃度下使用,降低對活細胞的毒性。

由於Fluo-4 AM不與細胞組分發生共價結合,它可能被有機陰離子轉運蛋白主動排出細胞。使用Fluo-4 AM進行體內細胞成像通常在加載後1-2小時內完成,但如有需要可重新向細胞加載染料。為了確定該染料的細胞定位,可使用EDC/EDAC將Fluo-4 AM在原位(in situ) 固定,並使用anti-BAPTA antibodies進行免疫化學復染。

Fluo-4 AM 在水中的溶解度較低,建議先以 標示等級的 DMSO 配製 1 mM 儲備液,再進行細胞染色。一般建議的最終濃度為 1–5 μM,在 37 °C 培養 15–60 分鐘作為起始條件。

[1] Cell Calcium. 2000. 27(2). 97-106. [2] Cell Calcium. 1997. 21(3). 175-183.

染色標題

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外观: 橙紅色粉末
分子量: 1096.95
CAS 编号: 273221-67-3
分子式: C51H50F2N2O23
IUPAC 名称: N-[4-[6-[(Acetyloxy)methoxy]-2,7-difluoro-3-oxo-3H-xanthen-9-yl]-2-[2-[2-[bis[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]amino]-5-methylphenoxy]ethoxy]phenyl]-N-[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]glycine (acetyloxy)methyl ester
溶解度: 在DMSO中效果良好
质量控制: NMR 1H and HPLC-MS (95+%)
储存条件: 收到後可在-20℃黑暗條件下保存24個月。運輸:室溫下可保存長達3週。乾燥保存。
MSDS: 下載
產品規格

激发/吸收极大值,纳米: 494
发射极大值,纳米: 518

產品引用

  1. Turchaninova, E.; Robustova, S.; Kovalenko, S.; Dzhabrailov, V.; Dolgodvorova, A.; Romanova, S.; Zybin, D.; Popov, M.; Miftakhova, A.; Frolova, S.; Slotvitsky, M.; Romanov, A.; Agladze, K.; Tsvelaya, V. Refining Fibroblast-to-Cardiomyocyte Transdifferentiation Protocols to Explore Emergent Self- Organization in Cardiac Cultures. Research Square, 2025, preprint. doi: 10.21203/rs.3.rs-7186257/v1
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